期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
缺氧条件下SNAI1激活基质金属蛋白酶对脉络膜新生血管生成的促进作用
孙嘉星；窦国睿；常天芳；李曼红；杨子岩；晏贤春；刘瑗；韩骅；王雨生
关键词：脉络膜新生血管, 基质金属蛋白酶, 小干扰RNA, 转录因子SNAI1, 血管内皮细胞, 动物模型, 缺氧
摘要：目的 探讨缺氧环境下活化的血管内皮细胞是否可诱导SNAI1表达上调,进而通过SNAI1-基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9途径参与CNV生成. 方法 选取SPF级6～8周龄雄性C57小鼠16只并分为对照组和模型组,采用视网膜激光光凝法诱导小鼠CNV模型.于造模后7d摘取小鼠眼球以制备视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜-巩膜复合体铺片和冰冻切片,采用Isolectin B4免疫荧光染色技术检测脉络膜铺片中CNV形成情况,并观察CNV组织附近血管内皮细胞中SNAI1、MMP2和MMP9的表达及定位;采用实时荧光定量PCR法检测CNV组织中SNAI1、MMP2和MMP9 mRNA的表达变化.将培养的恒河猴脉络膜/视网膜内皮(RF/6A)细胞分为常氧组和缺氧组,分别在含体积分数5％ CO2培养箱或含体积分数94％N2、5％ CO2和体积分数1％O2培养箱中孵育24 h,分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot技术测定各组细胞中SNAI1、MMP2和MMP9在转录水平和蛋白水平的表达变化.用小干扰SNAI1(siSNAI1)转染RF/6A细胞,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测细胞中MMP2和MMP9在转录和蛋白水平的表达变化,并采用Transwell小室法检测血管内皮细胞的迁移数目. 结果 造模后7d小鼠脉络膜铺片中可见CD31阳性和SNAI1阳性荧光染色细胞及双阳性细胞;模型组小鼠RPE-脉络膜-巩膜复合体中SNAI1 mRNA和MMP2mRNA相对表达量分别为1.291±0.060和1.610±0.424,均明显高于对照组的0.759±0.074和0.772±0.080,差异均有统计学意义(P=0.001、0.044),模型组小鼠RPE-脉络膜-巩膜复合体中MMP9 mRNA升高,但与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),且MMP2 mRNA表达量高于MMP9 mRNA,差异有统计学意义(P＜0.01).缺氧组RF/6A细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、SNAI1和MMP2 mRNA及其蛋白的相对表达量均明显高于常氧组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),各组间MMP9 mRNA相对表达量的差异无统计学意义(P＞0.05).缺氧+siSNAI1组RF/6A细胞中MMP2 mRNA相对表达量为0.217±0.036,明显低于单纯缺氧组的0.818土0.105;缺氧+siSNAI1组RF/6A细胞中MMP2蛋白相对表达量为0.236±0.009,明显低于单纯缺氧组的1.043±0.120,差异均有统计学意义(P=0.002、0.003).siSNAI1组血管内皮细胞迁移数目为(254.60±71.31)/视野,明显少于正常对照组的(534.10±96.21)/视野,差异有统计学意义(P=0.029). 结论 CNV局部的缺氧环境可能通过上调血管内皮细胞中SNAI1的表达而激活MMP2,促进血管内皮细胞迁移,从而参与CNV生成;缺氧条件下SNAI1的下调可抑制上述过程.
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