期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
慢病毒介导星形胶质细胞活化基因-1沉默对葡萄膜黑色素瘤生物学行为的影响
毛英；白海霞；畅颖；李彬
关键词：葡萄膜黑色素瘤, 星形胶质细胞活化基因-1, 慢病毒载体, 细胞增生, 凋亡, 侵袭, 转移
摘要：目的 探讨星形胶质细胞活化基因-1(AEG-1)对葡萄膜黑色素瘤(UM)生物学行为的影响.方法 培养不同侵袭转移潜能的MUM-2B和MUM-2C细胞系,根据AEG-1基因序列设计出有效RNA干扰(RNAi)靶点序列及RNAi阴性对照scramble序列进行慢病毒载体的制备和病毒包装.在2株细胞系中,经AEG-1-RNAi慢病毒感染的细胞作为慢病毒感染组,空白慢病毒载体感染的细胞作为阴性对照组,未处理的细胞作为正常对照组.采用Real-time PCR、Western blot法分别检测各组细胞中AEG-1转录水平和蛋白表达水平;采用MTT法、Annexin V-APC法、细胞侵袭试验和细胞Transwell试验检测慢病毒介导AEG-1沉默对人UM细胞系生物学行为的影响.结果 成功制备RNAi慢病毒载体而进行病毒包装,然后分别转染对数生长期的MUM-2B、MUM-2C细胞系,2株细胞系中的正常对照组、阴性对照组和慢病毒感染组间细胞中AEG-1 mRNA相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=130.02,P＜0.01;F=144.17,P＜0.01).在MUM-2B细胞系中和MUM-2C细胞系中,染组较阴性对照组AEG-1 mRNA相对表达量分别下降约77.1％和79.8％,差异均有统计学意义(均P＜0.01);正常对照组与阴性对照组细胞中AEG-1 mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).Western blot法检测结果显示,AEG-1蛋白表达水平在2株细胞系中的各组比较,差异均有统计学意义(F=146.17,P＜0.01;F=156.79,P＜0.01),其中慢病毒感染组较阴性对照组蛋白相对表达均显示下调,差异均有统计学意义(均P＜0.01).MTT法检测发现,2株细胞系实验第2～5天,慢病毒感染组细胞增生倍数较阴性对照组明显下降,差异均有统计学意义(t=5.78、30.68、23.99、29.40,均P＜0.01;t=7.88、7.09、5.56、6.60,均P＜0.01);Annexin V-APC法检测发现,2株细胞系中慢病毒感染组凋亡率明显高于阴性对照组,差异均有统计学意义(t=54.34,P＜0.01;t=11.68,P＜0.01);细胞侵袭试验发现,在2株细胞系中慢病毒感染组侵袭倍数明显低于阴性对照组,差异均有统计学意义(t=16.04,P＜0.01;t=13.98,P＜0.01);细胞Transwell试验发现,在2株细胞系中慢病毒感染组转移倍数均明显低于阴性对照组,差异均有统计学意义(t=12.04,P＜0.01;t=22.43,P＜0.01).结论 慢病毒介导AEG-1沉默后,通过抑制UM细胞AEG-1的转录水平和蛋白表达水平,从而改变UM细胞的生物学行为,一定程度上减缓细胞增生,促进细胞凋亡并降低细胞侵袭和转移的能力.
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