AG490抑制STAT3信号通路活性对豚鼠形觉剥夺性近视巩膜重塑的调控

摘要：背景近年来研究发现,JAK/信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)信号转导通路在近视形成和发展中发挥重要作用,AG490是JAK的一种特异抑制剂,因此可抑制JAK2/STAT信号转导,但AG490是否能抑制或延缓近视的进展尚不清楚. 目的探讨玻璃体腔注射酪氨酸激酶选择性抑制剂AG490后STAT3信号通路的活性及其对豚鼠形觉剥夺性近视(FDM)过程中巩膜重塑的影响.方法采用随机数字表法将40只豚鼠随机分为正常对照组、模型对照组、PBS对照组和AG490治疗组,其中模型对照组、PBS对照组和AG490治疗组均用半透明眼罩遮盖右眼4周以制备FDM模型,自遮盖当天向PBS对照组和AG490治疗组豚鼠实验眼玻璃体腔分别注射PBS或AG490各5μl,每2天注射1次,至遮盖结束.分别于实验前及实验后4周检测各组豚鼠双眼的屈光度和眼轴长度,实验4周时摘取实验眼眼球制备巩膜组织切片,采用常规组织病理学检查观察实验眼巩膜的形态学改变,采用免疫组织化学及逆转录PCR(RT-PCR)技术检测各组实验眼巩膜组织中STAT3、p-STAT3、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白及其mRNA的表达.结果与正常对照组比较,模型对照组、PBS对照组和AG490治疗组豚鼠实验眼的近视屈光度增加,眼轴明显增长,AG490治疗组眼轴长度分别短于模型对照组和PBS对照组,4个组间差异均有统计学意义(屈光度:F=89.063,P=0.000;眼轴长度:F=96.145,P=0.000).正常对照组豚鼠巩膜组织中STAT3、MMP-2、p-STAT3表达极微弱,AG490治疗组巩膜组织中STAT3、p-STAT3、MMP-2相对表达量(A值)分别为0.064±0.016、0.019±0.002和0.155±0.052,分别低于模型对照组的0.129±0.008、0.071±0.021、0.425±0.004和PBS对照组的0.130±0.004、0.069±0.002、0.421±0.042,差异均有统计学意义(STAT3:t=4.641,9.364,均P＜0.01;p-STAT3:t=4.638、4.488,均P＜0.05;MMP-2:t =9.123、9.029,均P＜0.05),AG490治疗组的表达仍高于正常对照组(t=2.674、2.251、2.682,均P＜0.05).AG490治疗组巩膜组织STAT3 mRNA和MMP-2 mRNA的相对表达量分别为0.295±0.032和0.569±0.019,明显低于模型对照组的0.547±0.015和0.782±0.051以及PBS对照组的0.544±0.015和0.779±0.048,差异均有统计学意义(STAT3 mRNA:t=10.115、11.703,均P＜0.01;MMP-2 mRNA:t=9.218、9.494,均P＜0.01),但与正常对照组STAT3 mRNA水平比较仍有明显上调,差异均有统计学意义(t=2.576、3.565,均P＜0.05). 结论 AG490可一定程度上阻断FDM眼巩膜组织中STAT3信号转导通路的激活,进而调控其下游靶基因MMP-2的转录和表达,减缓FDM眼巩膜的重塑过程,从而一定程度上抑制轴性近视的进展.