干眼与CC趋化因子受体5和CXC趋化因子受体3及其配体介导的炎性反应的关系

摘要：背景 干眼患者泪液分泌功能的持续异常导致眼表和泪腺处于长期炎性细胞浸润状态,炎症反应刺激淋巴细胞增生以产生对泪腺的免疫攻击,且炎症本身亦干扰腺体的正常分泌,其中趋化因子及其受体对淋巴细胞趋化、聚集到炎症部位起着关键的作用. 目的 分析干眼患者眼表细胞中CC趋化因子受体5(CCR5)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)及其配体的表达变化,探讨以CCR5、CXCR3为特征的Th1细胞诱导的迟发性变态反应在干眼发生和发展中的机制.方法 采用前瞻性研究方法.纳入2012年6-12月在新疆医科大学第一附属医院眼科确诊的干眼患者30例60眼及年龄和性别匹配的健康志愿者30人60眼,受试者均接受泪膜破裂试验(BUT)、基础泪液分泌试验Ⅰ(SⅠt)和角膜结膜荧光素染色检查.采用结膜印记细胞学的方法获取2个组受试者的结膜上皮细胞,应用流式细胞术分析2个组受试者结膜组织CCR5、CXCR3表达阳性细胞率;应用real-time PCR对受检者结膜中正常T细胞表达和分泌调节活性因子(RANTES)、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α、MIP-1 β、γ干扰素诱导的单核因子(MIG)、γ干扰素诱导蛋白10(IP10)及干扰素诱导T细胞α趋化因子(I-TAC) mRNA的相对表达量进行检测,比较干眼组和健康对照组受试者间CCR5、CXCR3及其配体表达的差异,分析CCR5、CXCR3阳性表达率与BUT、SⅠt及角膜结膜荧光素染色评分的关系.结果 干眼组BUT、SⅠt值分别为(2.90 ±1.37)s和(4.00 ±2.49) mm/5 min,明显低于健康对照组的(8.56 ±4.69)s和(11.31 ±5.23) mm/5 min,差异均有统计学意义(t=3.172、2.186,均P＜0.05);干眼组角膜结膜荧光素染色评分及CCR5和CXCR3的阳性表达率分别为0.90 ±0.57、(3.38±0.66)％和(2.64±0.47)％,均明显高于对照组的0.14 ±0.06、(2.12±0.21)％和(1.12±0.11)％,差异均有统计学意义(t=2.297、3.151、5.454,均P＜0.05).干眼组CCR5阳性细胞率与BUT、SⅠt值均呈负相关(r=-0.473、-0.385,均P＜0.05),CXCR3阳性细胞率与BUT、SⅠt值均呈负相关(r=-0.753、-0.684,均P＜0.05);CCR5与CXCR3阳性细胞率及角膜结膜荧光素染色评分均呈正相关(r=0.231、0.336,均P＜0.05).干眼组RANTES、MIP-1α、MIG和IP10 mRNA的相对表达量明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(t=3.091、2.894、2.688、2.245,均P＜0.05),而2个组间MIP-1β和I-TAC mRNA相对表达量的差异均无统计学意义(t=0.512、1.979,均P＞0.05).CCR5阳性细胞率与结膜中RANTES和MIP-1αmRNA相对表达量均呈正相关(r=0.473、0.285,均P＜0.05),而CCR5与MIP-1β则无明显相关性(r=0.214,P＞0.05).CXCR3阳性细胞率与MIG和IP10 mRNA相对表达量均呈正相关(r=0.553、0.314,均P＜0.05);CXCR3与I-TAC mRNA的相对表达量间无明显相关(r=0.364,P＞0.05).结论 干眼的发生可能伴随着炎性细胞的长期浸润,以CCR5、CXCR3为标志的Th1型细胞及自然杀伤细胞诱导的迟发性变态反应可能是导致干眼眼表损伤的主要原因,CCR5和CXCR3及其配体可作为调节干眼组织免疫炎症反应的靶点.