期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
Stargardt病Ⅲ型致病基因ELOVL4在脂肪酸代谢中的功能研究
余曼；陈波；张瑞帆；吴峥峥
关键词：不饱和脂肪酸/生物合成, 黄斑变性/遗传性, 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株, 气相色谱-质谱联用仪, 免疫印迹法, 实时定量PCR, ELOVL4基因, Stargardt黄斑营养不良
摘要：背景 研究证实,超长链脂肪酸延伸酶4(ELOVL4)基因是Stargardt病的致病基因,且ELOVL4可能是C≥28的超长链脂肪酸的延伸酶,而常染色体显性遗传Stargardt病Ⅲ型(STGD3)的发病可能与视网膜中C≥28的超长链脂肪酸的代谢有关.探讨ELOVL4在STGD3发病中的作用及其与超长链脂肪酸代谢的关系有望对STGD3的治疗提供新的思路. 目的 探讨ELOVL4基因在STGD3发病和进展中的作用及机制.方法 将腺病毒(Ad)转染重组病毒质粒36 h的人胚肾293细胞(HEK293)以纯化病毒,构建携带ELOVL4基因和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒载体并转入培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株(PC12),将培养的PC12细胞分成PC12组、PC12+ Ad5-GFP组和PC12+ Ad5-ELOVL4组,根据分组情况分别将Ad-GFP和Ad-ELOVL4病毒质粒按1×104～2×104噬斑形成单位(pfu/ml)的滴度加入含质量分数2％胎牛血清(FBS)的细胞培养液转导24 h,采用实时定量PCR法(qRT-PCR)定量分析各组细胞中ELOVL4 mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测细胞中ELOVL4蛋白的表达.分别在各组培养基中加入花生四烯酸(AA或20:4n6)、二十碳五烯酸(EPA或20:5n3)和二十二碳六烯酸(DHA或22:6n3),孵育48 h后进行脂肪酸提取,通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析各组细胞中超长链脂肪酸产物. 结果 PC12+Ad-ELOVL4组、PC 12+ Ad-GFP组和PC12组间细胞中ELOVL4 mRNA表达水平(ELOVL4 mRNA/RPL19 mRNA)分别为0.833±0.138、0.027±0.002、0.024±0.002,3个组的总体差异有统计学意义(F=102.700,P=0.000),其中PC 12+ Ad5-ELOVL4组PC12细胞中ELOVL4 mRNA表达水平是PC12组和PC12+Ad5-GFP组的30 ～ 40倍;Western blot法检测结果证实,PC12+Ad5-ELOVL4组PC12细胞中ELOVL4蛋白呈阳性表达.GC-MS法检测发现PC 12+ Ad5-ELOVL4组PC12细胞中有C28-C38多不饱和脂肪酸的合成,其中均以C34和C36多不饱和脂肪酸合成量多.结论 ELOVL4蛋白酶可催化C28-C38多不饱和脂肪酸的合成,这个结论为STGD3患者的治疗提供了新的思路.
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