期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
p16INK4a基因及其抑制基因Bmi1在不同年龄人角膜内皮细胞中的表达及其意义
臧新杰；王晔
关键词：角膜内皮细胞, 衰老, p16INK4A基因, Bmi1基因
摘要：背景 p16INK4a基因在细胞老化和早衰过程中发挥着重要作用,是目前已知的细胞衰老的主导基因.角膜内皮细胞(CECs)周期停滞于G1期且体内缺乏增生能力,是否与细胞衰老有关尚未得知. 目的 探讨不同年龄的正常人CECs中p16INK4a基因及其抑制基因Bmi1的表达. 方法 收集临床上DX液保存的行角膜移植手术后剩余的供体周边环状角膜组织,记录供体年龄.经锥虫蓝-茜素红双染法观察CECs的活性；行苏木精-伊红染色以证实角膜材料的组织结构正常.将收集到的角膜环材料按照年龄分为＜30岁组、30～ 50岁组和＞50岁组,每组30个角膜环,其中15个用于总RNA提取,另外15个角膜环等分为3份,分别用于免疫组织化学检测、免疫荧光检测和CECs活性的观察.提取每个角膜环的总RNA,行实时荧光定量PCR检测,观察p16INK4a mRNA、Bmi1 mRNA和Ki67 mRNA在CECs中的表达.行冰冻切片免疫组织化学染色,检测p16INK4a 、Bmi1和Ki67蛋白在CECs中的表达.免疫荧光法检测p16INK4a在CECs的表达. 结果 苏木精-伊红染色结果显示,供体角膜上皮、基质和内皮结构完整,排列规则.实时荧光定量PCR检测显示随年龄增长,p16INK4a mRNA的表达增强,而Bmi1 mRNA和Ki67 mRNA的表达减弱,差异均有统计学意义(F=5.703,P=0.014;F=3.950,P=0.042;F=548.500,P=0.000),其中与＜30岁组比较,＞50岁组p16INK4a mRNA在CECs中的表达量明显升高,而Bmi1 mRNA和Ki67 mRNA的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P=0.006、0.013、0.000).免疫组织化学结果可见,p16INK4a蛋白在各组CECs中均有表达,主要位于细胞核内,而Bmi1与Ki67在年老供体的表达强度均弱于年轻供体,与实时荧光定量PCR的结果基本一致.免疫荧光染色显示,年老供体CECs p16INK4a的表达强度强于年轻供体. 结论 细胞衰老主导基因p16INK4a的表达随年龄增加而增高,其抑制基因Bmi1的表达随年龄增加而降低.
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