重组人BIGH3蛋白滴眼液对兔角膜上皮损伤的修复作用

摘要：背景 角膜上皮损伤可导致角膜溃疡和基质混浊,甚至出现不可逆的视功能损害,以往采用的药物治疗仅能缓解刺激症状,而促进角膜上皮细胞再生的作用较弱,因此寻求能有效调控角膜上皮细胞生长,从而有效治疗角膜上皮损伤的药物至关重要. 目的 探讨重组人BIGH3蛋白滴眼液对角膜上皮损伤的修复作用.方法 50只清洁级健康成年新西兰大白兔,均取右眼为实验眼,其中2只兔制作角膜上皮损伤模型后即刻行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色,眼前节照相后处死；48只兔按照随机数字表法随机分为重组人表皮生长因子(EGF)衍生物组(阳性对照组)、生理盐水组(阴性对照组)、质量分数0.25％重组人BIGH3蛋白滴眼液组及0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组,每组12只.在直径7 mm环钻内滴入体积分数20％乙醇,置于角膜中央区60 s,然后用角膜刮匙刮去角膜上皮,制作角膜上皮缺损模型.术后各组兔眼分别点用相应药物,每天4次,分别于术后12、24、36、48、72 h行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色,于12、24、36、48 h采用抽签法各处死2只实验兔,72 h时各处死4只实验兔,制备角膜组织标本并行苏木精-伊红染色,观察并比较各组兔眼在不同时间点角膜上皮修复情况,应用计算机图像处理系统测量各组兔眼不同时间点角膜上皮愈合面积.结果 各组兔眼用药后均未发现任何眼部刺激症状.组织病理学研究发现,造模后即刻全层角膜上皮缺损,随着时间的延长,实验组及对照组兔角膜上皮缺损区皆逐渐变小,可见周边角膜上皮向中央缺损区移行,细胞层数逐渐增加,细胞排列极向逐渐趋于规则.重组人EGF衍生物组、生理盐水组、0.25％及0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜上皮愈合速率分别为15.00、13.81、18.05、18.86 mm2/d.与生理盐水组比较,术后12、24、36、48 h,0.25％、0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组及重组人EGF衍生物组角膜损伤面积明显缩小,差异均有统计学意义(均P=0.000),但造模12、24、36 h,重组人EGF衍生物组与生理盐水组比较差异均无统计学意义(P=0.321、0.057、0.126).与重组人EGF衍生物组比较,术后各时间点0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜损伤面积明显缩小,差异均有统计学意义(P=0.042、0.039、0.025、0.008),0.25％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜损伤面积仅在术后12h、24 h明显缩小,差异均有统计学意义(P=0.047、0.042).术后各时间点0.25％、0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组间角膜损伤面积的差异均无统计学意义(P=0.358、0.259、0.108、0.062).术后72 h,生理盐水组角膜损伤面积为(0.51±0.42)mm2,而其他3个组角膜上皮均完全修复.角膜上皮修复曲线表明,0.25％及0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜上皮修复的相对面积均优于重组人EGF衍生物组和生理盐水组. 结论 0.25％及0.5％重组人BIGH3蛋白滴眼液对角膜上皮损伤的愈合有明显的促进作用,其作用优于EGF.