期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
羊膜对人视网膜色素上皮细胞增生和分化的影响
王瑶；宫华青；杨玲玲；王茜；周庆军；王宜强
关键词：羊膜, 视网膜色素上皮细胞, 增生, 分化
摘要：背景 人视网膜色素上皮(RPE)细胞移植治疗视网膜变性性疾病是目前的研究热点之一,许多生物载体可制备RPE细胞单层,但多存在着细胞毒性、稳定性差及免疫反应等问题. 目的 检测羊膜对人RPE细胞增生和分化的影响,探讨其作为人RPE细胞层载体进行移植的可能性. 方法 将RPE细胞系ARPE-19细胞株用含质量分数10％胎牛血清的DMEM/F12培养基进行培养和传代,8～12代细胞用于实验.将传代细胞分为2个组,一组细胞接种于去上皮羊膜作为实验组,另一组细胞直接在培养孔内进行培养作为对照组.分别于接种后24、48、72、96 h行MTT实验,测定RPE细胞的吸光度(A492)值以评估两组细胞在增生能力方面的不同；培养3周后的细胞层行苏木精-伊红染色,检测细胞在不同培养载体上是否存在形态学方面的区别；分别收集同一孔中生长于羊膜和培养板表面的细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测色素上皮衍生因子(PEDF)、钙黏蛋白(N-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)以及细胞连接相关蛋白的表达情况；同时收集培养3周时的细胞行透射电子显微镜和扫描电子显微镜检查,比较不同载体培养的ARPE-19细胞在超微结构方面的区别.结果 与对照组相比,实验组细胞增生的速度明显变缓,两组细胞增生情况比较差异有统计学意义(F=41.760,P=0.000).苏木精-伊红染色结果显示,同一培养孔内实验组的细胞密度明显低于对照组,说明羊膜对ARPE-19细胞增生的影响不是通过细胞分泌的可溶性因子的作用.RT-PCR结果显示,实验组细胞连接相关蛋白claudin 1、N-cadherin和PEDFmRNA在培养细胞上的表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(t=15.828,P=0.000;t=6.839,P=0.002;t=14.667,P=0.000)；Connexin 43的表达低于对照组,差异有统计学意义(t=3.358,P=0.024).超微结构分析发现羊膜载体上的细胞呈典型的多边形RPE细胞表型,分化现象明显,而普通培养板培养的RPE细胞形态主要呈梭形,细胞层厚薄不均.结论 去上皮羊膜为载体培养的RPE细胞增生速度变慢,但培养的细胞分化程度较高,提示羊膜可作为RPE细胞体外培养的良好载体,用于制备移植所需功能成熟的RPE细胞片层.
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