期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊原《眼科研究》，是中国科技论文统计源期刊和中文核心期刊。本刊关注国内外实验眼科学发展动态，传播眼科基础研究重大进展，报道眼科实验研究成果及其临床应用，读者对象为高等院校、科研单位和临床眼科工作者。本刊国内发行于包括港、澳、台在内的我国各省份和地区，国外发行在东南亚、北美、西欧等地区的部分国家。本刊期待刊出高质量的研究成果，以飨读者。
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首页>中华实验眼科杂志
- 杂志名称：中华实验眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：2095-0160
- 国内刊号：11-5989/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
腺相关病毒介导绿色荧光蛋白基因对体外培养IPE细胞的转染和表达
杨晓慧；孙葆忱
关键词：腺相关病毒, 绿色荧光蛋白基因, 虹膜色素上皮细胞, 体外, 转染
摘要：目的研究重组腺相关病毒(rAAV)载体介导的绿色荧光蛋白基因(GFP)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达,为rAAV携带目的基因治疗视网膜色素变性提供理论依据.方法酶辅助的显微分离方法体外培养IPE细胞并鉴定.按转染倍数(MOI)为103、104、105、106转染已培养3 d的传二代IPE细胞,转染后的第1、3、5、7、9 d,在倒置荧光显微镜下观察IPE中GFP表达阳性的情况,记录100个IPE细胞中GFP阳性所占的百分比.当GFP表达稳定后,共聚焦显微镜照相,流式细胞仪检测rAAV-GFP对IPE的转染效率.结果rAAV-GFP在细胞中的表达呈绿色,弥漫于整个胞浆.MOI=103时,转染后48 h,GFP开始表达,MOI=104、105、106时,转染后24 h时便可看到GFP表达阳性的细胞,细胞的起始表达强度不一,随MOI值的增高而增强,同时GFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强,转染后第7～9 d达到高峰并维持,此时检测rAAV-GFP对IPE的转染效率,MOI=103时是26.7%,MOI=104时是53.6%,MOI=105时是60.2%,MOI=106时是63.7%.结论rAAV-GFP对体外培养的IPE细胞转染效率可达60%以上,将腺相关病毒载体介导的基因治疗和IPE移植结合起来治疗视网膜色素变性是可行的.
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